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產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
多瘤病毒探針法PCR熒光定量試劑盒 | Washington University Polyomavirus(WUPyV)WU | EY00P9498 |
產品及特點:
熒光定量PCR是在PCR體系中加入熒光化合物(熒光染料或熒光探針)。利用熒光信號積累實時監測整個PCR進程,使每個循環變得“可見”。本產品就是以探針法熒光定量 RT-PCR 技術為基礎開發的專門檢測探針法熒光定量PCR試劑盒的試劑盒。
使用方法
一、稀釋標準曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產品穩定性和避免擴散傳染性病原,本產品不提供活體樣品做陽性對照,只提供無傳染性的 DNA 段作為陽性對照。
1. 標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 RT-PCR 模板稀釋液,用帶芯槍頭,下同)。
3. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照(試劑盒提供),充分震蕩1分鐘,得 1×10E7 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標準曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 RNA 的制備
7. 如果有N個樣品,設置N+2個提取,多出的一個是PC(樣品制備陽性對照),一個是 NC(樣品制備陰性對照)。可以用10μL陽性對照的10000倍稀釋液再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。
8. 用自選方法純化樣品的RNA,本試劑盒跟市場上大多數病毒RNA提取試劑盒兼容。也以選購本公司的柱式病毒RNAout。本試劑盒免費贈送20次免RNA提取的核酸釋放劑試用裝,該釋放劑的裂解液可以直接作為RT-PCR模板,省略了RNA提取步驟。
三、Probe qRT-PCR 反應(20μL 體系,在樣品制備室進行)
9. 如果做定量分析并且只做1次重復,則標記N+9個PCR 管,其中N+2個用于上步得到的 N+2個樣品,1個用于PCR陰性對照(用水做模板),6個用于標準曲線。如果做定性分析,并且只做1次重復,則標記N+4 個PCR管,其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),1個用于PCR陽性對照(用第4號管的陽性對照稀釋液做模板)。下面只以定量分析為例描述操作步驟。
10. 在標記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復。樣品管和陰性對照設置完畢后才設置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后加)
運輸及保存: 低溫運輸,-20℃保存,保存期限為12個月。
自備試劑:樣品 RNA。
分類:熒光定量PCR試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費。
客戶只需提供樣品和待檢測基因名稱即可。由我們提取RNA,設計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續數據分析,提供實驗報告給您。
染料法
探針法
可進行相對,定量表達分析,定性分析,SNP檢測等
實驗報告
電泳圖 ·標準曲線
溶解曲線 ·擴增曲線
完整的實驗過程、試劑、儀器及分析報告
降鈣素基因相關肽(8-37),大鼠1-丁基-3-甲基咪唑六氟磷酸鹽 97%Human HYAL1(Hyaluronidase-1) ELISA Kit
降鈣素基因相關肽Ⅱ,人1-丁基-3-甲基咪唑氯鹽 97%Human ZW10 ELISA Kit
降鈣素基因相關肽Ⅱ,大鼠1-丁基-3-甲基咪唑三氟甲磺酸鹽 97%Human ZWINT ELISA Kit
降鈣素基因相關肽,雞1-丁基-4-甲基吡啶六氟磷酸鹽 99%Human DHCR24 (Delta(24)-sterol reductase) ELISA KIT
降鈣素基因相關肽,大鼠冠6烯 98%Human SCG3(Secretogranin-3) ELISA Kit
降鈣素N末端旁側的肽段,人冠-8-烯 90%Human ZWILCH ELISA Kit
鈣/鈣調蛋白依賴的蛋白激酶Ⅱ-g(345-358)環己硫 98%Human BCKDHA ELISA Kit
鈣樣肽段4-氯吡啶-2-甲酸甲酯 98%Human BDH2 (3-hydroxybutyrate dehydrogenase type 2) ELISA KIT
鈣調蛋白依賴的蛋白激酶Ⅱ(281-289)1,3-二甲基咪唑鎓二甲基磷酸酯 98.0%Human BCKDK ([3-methyl-2-oxobutanoate dehydrogenase [lipoamide]] kinase, mitochondrial) ELISA KIT
鈣調蛋白依賴的蛋白激酶Ⅱ(281-309)1-乙基-3-甲基咪唑溴鹽 98%Human HMGCLL1 (3-hydroxymethyl-3-methylglutaryl-CoA lyase, cytoplasmic) ELISA KIT
鈣調蛋白依賴的蛋白激酶Ⅱ(290-309)1-乙基-3-甲基咪唑六氟磷酸鹽 98%Human HIBADH (3-hydroxyisobutyrate dehydrogenase, mitochondrial) ELISA KIT
Caloxin 2A11-乙基-3-甲基咪唑雙三氟甲磺酰亞鹽 97%Human ZSCAN5A ELISA Kit
鈣蛋白酶抑制劑肽1-乙基-3-甲基咪唑三氟甲磺酸鹽 98%Human ZNF763 ELISA Kit
cAMP依賴的蛋白激酶抑制劑(5-22),酰1-乙基-3-甲基咪唑鎓四氟酸鹽 97%Human ZNF750 ELISA Kit
cAMP依賴的蛋白激酶抑制劑(5-24)1-乙基-3-甲基氯化咪唑鎓[用于熔鹽] 98.0%Human MTRR (Methionine synthase reductase) ELISA KIT
多瘤病毒探針法PCR熒光定量試劑盒組蛋白脫乙酰基酶5(HDAC5)(酶聯免疫吸附試驗法)氯代叔丁烷(GCS,≥99.5% (GC)) 質量規格:>98.0%(GC)(N)
組蛋白脫乙酰基酶7(HDAC7)(酶聯免疫吸附試驗法)環己(Standard for GC,>99.5%(GC)) 質量規格:>99.0%(GC)
組蛋白脫乙酰基酶8(HDAC8)(酶聯免疫吸附試驗法)氯苯(standard for GC, ≥99.9% (GC)) 質量規格:>95.0%(GC)
組蛋白脫乙酰基酶9(HDAC9)(酶聯免疫吸附試驗法)鄰氯甲苯(standard for GC,≥99.5%(GC)) 質量規格:>95.0%(GC)
組蛋白脫乙酰基酶10(HDAC10)(酶聯免疫吸附試驗法)鄰甲酚(Standard for GC,≥99.7%(GC)) 質量規格:>97.0%(GC)
組蛋白脫乙酰基酶11(HDAC11)(酶聯免疫吸附試驗法)間甲酚(Standard for GC,≥99.7%(GC)) 質量規格:>98.0%(GC)
沉默調節蛋白3(SIRT3)(酶聯免疫吸附試驗法)對甲酚(Standard for GC,≥99.7%(GC)) 質量規格:>98.0%(GC)
沉默調節蛋白5(SIRT5)(酶聯免疫吸附試驗法)環戊酮(Standard for GC,≥99.5%(GC)) 質量規格:>99.0%(GC)