產品及特點:
熒光定量PCR是在PCR體系中加入熒光化合物(熒光染料或熒光探針)。利用熒光信號積累實時監測整個PCR進程,使每個循環變得“可見”。本產品就是以探針法熒光定量 RT-PCR 技術為基礎開發的專門檢測探針法熒光定量PCR試劑盒的試劑盒。
產品名稱 | 規格 | 貨號 |
鵪鶉源性成分探針法PCR熒光定量試劑盒 | 50次 | EY00P9514 |
運輸及保存: 低溫運輸,-20℃保存,保存期限為12個月。
自備試劑:樣品 RNA。
分類:熒光定量PCR試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費。
客戶只需提供樣品和待檢測基因名稱即可。由我們提取RNA,設計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續數據分析,提供實驗報告給您。
染料法
探針法
可進行相對,定量表達分析,定性分析,SNP檢測等
實驗報告
電泳圖 ·標準曲線
溶解曲線 ·擴增曲線
完整的實驗過程、試劑、儀器及分析報告
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使用方法
一、稀釋標準曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產品穩定性和避免擴散傳染性病原,本產品不提供活體樣品做陽性對照,只提供無傳染性的 DNA 段作為陽性對照。
1. 標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 RT-PCR 模板稀釋液,用帶芯槍頭,下同)。
3. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照(試劑盒提供),充分震蕩1分鐘,得 1×10E7 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標準曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 RNA 的制備
7. 如果有N個樣品,設置N+2個提取,多出的一個是PC(樣品制備陽性對照),一個是 NC(樣品制備陰性對照)。可以用10μL陽性對照的10000倍稀釋液再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。
8. 用自選方法純化樣品的RNA,本試劑盒跟市場上大多數病毒RNA提取試劑盒兼容。也以選購本公司的柱式病毒RNAout。本試劑盒免費贈送20次免RNA提取的核酸釋放劑試用裝,該釋放劑的裂解液可以直接作為RT-PCR模板,省略了RNA提取步驟。
三、Probe qRT-PCR 反應(20μL 體系,在樣品制備室進行)
9. 如果做定量分析并且只做1次重復,則標記N+9個PCR 管,其中N+2個用于上步得到的 N+2個樣品,1個用于PCR陰性對照(用水做模板),6個用于標準曲線。如果做定性分析,并且只做1次重復,則標記N+4 個PCR管,其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),1個用于PCR陽性對照(用第4號管的陽性對照稀釋液做模板)。下面只以定量分析為例描述操作步驟。
10. 在標記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復。樣品管和陰性對照設置完畢后才設置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后加)
Ⅲ型纖連蛋白連接段(1-25)蛋白酶K 用于分子生物學,≥30 units/mg proteinHuman WNT3(Proto-oncogene Wnt-3) ELISA Kit
異硫酸熒光素-LC-髓磷脂基礎蛋白肽底物玫瑰紅酸 ARHuman WRAP53 ELISA Kit
FluM1 A2 (58-66)二甲苯青FF 分子生物學級Human WDR81 ELISA Kit
Fmoc-Lys(Boc)-Leu-Lys(Boc)5-溴-4氯-3吲哚基β-D 半乳糖 99%Human WRN ELISA Kit
Fmoc-因子a紅色氧化鉛 98%Human WRNIP1 ELISA Kit
纖維結合素酰,軟體動物心臟興奮肽2-羥基-3-萘甲酸 97%Human WDR92 ELISA Kit
纖維結合素樣神經肽;分裂FLRF酰L-蘋果酸 98%Human WIT1 ELISA Kit
纖維結合素相關肽,椎實螺七肽L-蘋果酸 CPHuman WNK4 ELISA Kit
纖維結合素相關肽,Pyr -DPFLRFM - NH2鉻酸銫 AR,99.5%Human WNT3(Proto-oncogene Wnt-3) ELISA Kit
纖維結合素相關肽,SDPFLRF - NH2四酸鋰 99%Human WRAP53 ELISA Kit
Forkhead導出肽,Woodtide四酸鋰 99.9%Human WRN ELISA Kit
甲酰基黃體生成素釋放激素(2-10)四酸鋰 99.99%Human WDR81 ELISA Kit
G-A-Y溴化鋰 99.9% metals basisHuman WSB1 ELISA Kit
G-F-R甲鈷 98%Human WDR92 ELISA Kit
G-P-R去氧膽酸 98%Human WRNIP1 ELISA Kit
鵪鶉源性成分探針法PCR熒光定量試劑盒Midline 2蛋白(MID2)(酶聯免疫吸附試驗法)Celite硅藻土,酸洗(用于總膳食纖維含量分析,TDF-100A) 質量規格:>98.0%(GC)
多聚蛋白2(MMRN2)(酶聯免疫吸附試驗法)Celite硅藻土,酸洗(用于總膳食纖維含量分析,TDF-100A) 質量規格:>98.0%(GC)
Metaxin 2蛋白(MTX2)(酶聯免疫吸附試驗法)Celite® 硅藻土545(助濾劑,通量煅燒(filter aid,flux calcined)) 質量規格:>98.0%(GC)
黑素皮質激素4受體(MC4R)(酶聯免疫吸附試驗法)Celite® 硅藻土545(助濾劑,通量煅燒(filter aid,flux calcined)) 質量規格:>98.0%(GC)
黑素皮質激素5受體(MC5R)(酶聯免疫吸附試驗法)氯己定(標準品) 質量規格:>98.0%(GC)(T)
神經元導向因子3(NAV3)(酶聯免疫吸附試驗法)氯己定(標準品) 質量規格:>98.0%(GC)
神經元導向因子2(NAV2)(酶聯免疫吸附試驗法)香茅(分析標準品,≥99.0%(GC)) 質量規格:>96.0%(GC)
溶血磷脂酶Ⅲ(LYPLA3)(酶聯免疫吸附試驗法)香茅(分析標準品,≥99.0%(GC)) 質量規格:>97.0%(GC)