綜合微生物的培養方法,包括以下步驟:
(1)前期準備:(A)滅菌處理;(B)制備Biolite水;(C)檢查設備和材料;
(2)按比例配制培養材料;
(3)導入曝氣,進行繁殖培養;
(4)取液觀察;(a)取液;(b)稀釋菌液;(c)平板培養;
(5)分離并檢測;
(6)取液儲存;通過該綜合微生物培養方法簡單可操作性強,培養的綜合微生物均在3代以內,菌類穩定不發生突變,且繁殖快速。
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規格參數:
產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
乳酸片球菌規格 | Pediococcus acidilactici | EY-J963215 |
資源名稱: 乳酸片球菌
種屬: Pediococcus acidilactici
分離基物: 發酵牦牛乳
提供形式: 凍干物
安全等級: 1
模式菌株: no
應用領域: 酸奶
培養基: MRS培養基:酪胨 10.0g,牛肉粉 8.0g,酵母粉 4.0 g,葡萄糖 20.0 g,鎂 0.2 g,乙酸鈉 5.0 g,檸檬酸三銨 2.0 g, 2.0 g,錳 0.05 g,吐溫80 1.0 g,蒸餾水 1000mL。pH6.2±0.2。
生長條件: 37℃,兼性厭氧,3d
存儲條件: 液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法
低溫存法:
①簡單保存法,將瓊脂斜面孢子培養物、菌絲懸浮液以及由麩皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培養物置于4℃冰箱保存,保存時間不超過1~2個月,若將谷物原料制備的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蠟,以隔絕外界空氣和水汽,保持時間可達3~4個月;②液氮超低溫保存法,將生長穩定期的細胞懸浮在10%甘油或其他低冰點液體中,密封于安瓿管內,然后控制冷卻速度,使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時,即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多數微生物如病毒、噬菌體、多種細菌、放線菌、酵母和原蟲、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物,都可用此法保存。
微生物菌種的培養:
⒈ 孢子制備
⑴ 放線菌孢子的制備
一般采用瓊脂斜面培養基,培養基中含有一些適合產孢子的營養成分,如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無機鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1%,氮源不超過0.5%),碳源豐富容易造成酸性的營養環境,不利于放線菌孢子的形成,氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下,干燥和限制營養可直接或間接誘導孢子形成。放線菌斜面的培養溫度大多數為28 ℃,少數為37 ℃,培養時間為5~14天。
⑵ 霉菌孢子的制備
霉菌的孢子培養,一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農產品為培養基。這是由于這些農產品中的營養成分較適合霉菌的孢子繁殖,而且這類培養基的表面積較大,可獲得大量的孢子。霉菌的培養一般為25~28 ℃,培養時間為4~14天。
⒉ 種子制備
⑴ 搖瓶種子制備
搖瓶種子進罐,常采用母瓶、子瓶兩級培養,有時母瓶種子也可以直接進罐。種子培養基要求比較豐富和*,并易被菌體分解利用,氮源豐富有利于菌絲生長。原則上各種營養成分不宜過濃,子瓶培養基濃度比母瓶略高,更接近種子罐的培養基配方。
⑵ 種子罐種子制備
種子罐種子制備的工藝過程,因菌種不同而異,一般可分為一級種子、二級種子和三級種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中,經培養后形成大量的菌絲,這樣的種子稱為一級種子,把一級種子轉入發酵罐內發酵,稱為二級發酵。如果將一級種子接入體積較大的種子罐內,經過培養形成更多的菌絲,這樣制備的種子稱為二級種子,將二級種子轉入發酵罐內發酵,稱為三級發酵。同樣道理,使用三級種子的發酵,稱為四級發酵。
Serratia liquefaciens 中文名稱:液化沙雷氏菌Serratia liquefaciens提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:yes應用領域:分類學研究,質量控制培養方法培養基:CM0002生長條件:30℃存儲條件:真空冷凍干燥法 純度:≥98% (HPLC)
Aspergillus nigerCMCC(F) 98003 中文名稱:黑曲霉 Aspergillus nigerCMCC(F) 98003模式菌株:未知應用領域:0.5~1.0×10³cfu/顆 1顆/支 純度:≥98% (HPLC)
Cryptococcus│albidus 中文名稱:淺白隱球酵母Cryptococcus│albidus分離基物:復合飼料提供形式:斜面培養物安全等級:1模式菌株:no應用領域:飼料用。培養方法培養基:CM0077生長條件:28-30℃存儲條件:定期移植法 純度:97%
Torulopsis│globosa 中文名稱:球擬圓酵母Torulopsis│globosa提供形式:斜面培養物安全等級:1模式菌株:no應用領域:食用酵母。培養方法培養基:CM0077生長條件:28-30℃存儲條件:定期移植法 純度:97%
Candida│gelidadi 中文名稱:凍膠假絲酵母Candida│gelidadi分離基物:酒曲提供形式:斜面培養物安全等級:1模式菌株:no應用領域:用于曲酒增香。培養方法培養基:CM0077生長條件:28-30℃存儲條件:定期移植法 純度:97%
Torulopsis│dattila 中文名稱:棗椰球擬酵母Torulopsis│dattila提供形式:斜面培養物安全等級:1模式菌株:no應用領域:以糖蜜為原料發酵酒精。培養方法培養基:CM0077生長條件:28-30℃存儲條件:定期移植法 純度:97%
Saccharomyces│chevalieri 中文名稱:薛瓦酵母Saccharomyces│chevalieri分離基物:蘋果李子提供形式:斜面培養物安全等級:1模式菌株:no應用領域:釀造李子酒。培養方法培養基:CM0077生長條件:28-30℃存儲條件:定期移植法 純度:95%
Candida│lipolytica var. lipolytica 中文名稱:解酯假絲酵母解酯變種Candida│lipolytica var. lipolytica提供形式:斜面培養物安全等級:1模式菌株:no應用領域:石油發酵制檸檬及異檸檬。培養方法培養基:CM0077生長條件:28-30℃存儲條件:定期移植法 純度:95%
乳酸片球菌規格營養肉湯(NB)人星形膠質細胞原代上皮細胞特制基礎培養基A Beta1-40 (H-3-me6;H-3-me13;H-3-me14; Beta-Amyloid 1-40) β淀樣肽1-40(結構改造)
營養肉湯(NB)人星形膠質細胞原代內皮細胞特制基礎培養基A Beta29-40( Beta-Amyloid 29-40) β淀樣肽29-40(野生型)
營養瓊脂(NA)人星形膠質細胞原代平滑肌細胞特制基礎培養基A Beta29-42( Beta-Amyloid 29-42) β淀樣肽29-42(野生型)
營養瓊脂(NA)人小腦星形膠質細胞原代成纖維細胞特制基礎培養基Beta-Amyloid (1-42) β淀樣肽(1-42)
乳糖膽鹽發酵培養基人脊髓星形膠質細胞原代心肌細胞特制基礎培養基Amyloid Beta 25-35( Beta-Amyloid 25-35) β淀樣肽25-35(多肽)
乳糖膽鹽發酵培養基人海馬星形膠質細胞原代表皮角化細胞特制基礎培養基Beta-Amyloid 1-42 CT β淀樣肽 1-42 (C端多肽)
乳糖復發酵培養基(乳糖發酵培養基)人腦干星形膠質細胞原代系膜細胞特制基礎培養基Amylin 糖尿病相關肽(胰島淀樣肽)
乳糖復發酵培養基(乳糖發酵培養基)人中腦星形膠質細胞原代肝實質細胞特制基礎培養基APP695-770 (Amyloid protein precursor) 淀樣肽前體蛋白(多肽抗原)