公司細(xì)胞廣泛用于國內(nèi)院校的細(xì)胞生物學(xué)研究,作為實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目研究。下列產(chǎn)品詳細(xì)介紹:
產(chǎn)品名稱 | 生長(zhǎng)特性 | 貨號(hào) |
膀胱癌細(xì)胞;H/RB-CL2 | 貼壁生長(zhǎng) | EY-X63683 |
細(xì)胞名稱 膀胱癌細(xì)胞;H/RB-CL2
形態(tài)特性: 上皮細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性: 貼壁生長(zhǎng)
特征特性: 該細(xì)胞屬保藏,其特征特性尚未公開。
培養(yǎng)條件: MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS
傳代方法: 1:3傳代,3-4天傳1次
傳代情況: C4
凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè): 陰性
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冷凍保存細(xì)胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(shí)(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過1 小時(shí), 以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕;
4.如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
Matrine
CAS No.:519-02-8
中文名:苦參
分子式:C15H24N2O
異綠原 C 訂購|咨詢 樣糖基轉(zhuǎn)移酶(LARGE) 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/vial
桑皮苷C 訂購|咨詢 根蛋白(RDX) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg/vial
黃芪皂苷 III 訂購|咨詢 速激肽1(TAC1) 規(guī)格: HPLC≥98%,10mg/vial
羥基積雪草苷 訂購|咨詢 速激肽4(TAC4) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg/vial
黃芪皂苷 I 訂購|咨詢 速激肽受體1(TACR1) 規(guī)格: HPLC≥98%,10mg/vial
雙氫素 訂購|咨詢 速激肽受體1(TACR1) 規(guī)格: C15H24O5,UV≥98%
蒼耳子對(duì)照藥材 訂購|咨詢 速激肽受體1(TACR1) 規(guī)格: 1g
氧基白屈菜紅 訂購|咨詢 速激肽受體2(TACR2) 規(guī)格: 10mg
朝藿定A 訂購|咨詢 速激肽受體2(TACR2) 規(guī)格: 20mg
杠柳苷 訂購|咨詢 速激肽受體2(TACR2) 規(guī)格: 20mg
偽原 訂購|咨詢 速激肽受體2(TACR2) 規(guī)格: 20mg
牛蒡子苷元 訂購|咨詢 速激肽受體3(TACR3) 規(guī)格: 20mg
紫蘇葉對(duì)照藥材 訂購|咨詢 配子發(fā)育蛋白(GGN) 規(guī)格: 1g
牛磺 訂購|咨詢 配對(duì)框基因6(PAX6) 規(guī)格: 20mg
透骨草對(duì)照藥材 訂購|咨詢 配對(duì)框基因9(PAX9) 規(guī)格: 1g
東莨菪苷 訂購|咨詢 夏科雷登氏結(jié)晶蛋白(CLC) 規(guī)格: 10mg
甘草查爾A 訂購|咨詢 夏科雷登氏結(jié)晶蛋白(CLC) 規(guī)格: 20mg
川芎嗪 訂購|咨詢 破骨細(xì)胞關(guān)聯(lián)受體(OSCAR) 規(guī)格: 100mg
IL11RA 白介素11受體α/IL11Rα抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Imipenem and Cilastatin Sodium
KQ1 離子通道蛋白家族KQ1抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml Vinpocetine
IL10 白細(xì)胞介素10抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml Phenytoin sodium
LIPG/Endothelial lipase 內(nèi)皮脂肪酶抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Oxcarbazepine
MSR1/CD204 巨噬細(xì)胞清道夫受體1/2/3抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Oxcarbazepine
NPC1/Niemann Pick C1 尼曼匹克C1前體蛋白抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Hypericin
Perilipin A+B 脂滴包被蛋白A+B抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml D(+)Glucopyranose 6phosphate
FLIP delta + gamma 凋亡調(diào)節(jié)蛋白δ+γ抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml DGluconate 6phosphate 3sodium salt
三脫腺苷 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:dATP,2Na 含量:BR,98%
三脫胸苷 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:TTP 含量:生物技術(shù)級(jí),95%
三代蔗糖 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Sucralose 含量:高純,98%
三鉍 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:BismuthChloride 含量:BR
三 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Iodinetrichloride 含量:CP,90%
三鉻 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Chromicchloridehexahydrate 含量:AR
三金 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Gold(III)chloride 含量:特純,97%
三釹 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Neodymium(III)chloride 含量:超純,99.5%
三鈰 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Cerouschloride 含量:試劑級(jí),98%
三銦 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Indiumchloride 含量:GR,99.8%
膀胱癌細(xì)胞;H/RB-CL2MMO-MUG培養(yǎng)基規(guī)格:100g用途:用于生活飲用水及其水源水中大腸菌群和大腸埃希氏菌的同時(shí)檢測(cè)
阪崎腸桿菌顯色培養(yǎng)基(DFI瓊脂)規(guī)格:1000ml用途:用于阪崎桿菌的顯色培養(yǎng),阪崎桿菌顯藍(lán)色,其它腸桿菌顯無色。
萘啶(9mg)規(guī)格:1ml/支*5用途:每支添加于225ml HB4186中
化鈉結(jié)晶紫增菌液規(guī)格:250g用途:用于副溶血性弧菌的選擇性增菌培養(yǎng)(GB標(biāo)準(zhǔn))
鼠李糖發(fā)酵管規(guī)格:20支用途:用于單增李氏菌生化鑒定
磷鹽葡萄糖胨水培養(yǎng)基規(guī)格:BR250g詳情介紹
操作步驟:
1、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量 生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細(xì)胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來,吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的 *細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過長(zhǎng),未及吹打細(xì)胞,細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細(xì)胞,盡量去除細(xì)胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞,即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。