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產品名稱:
胚肺二倍體細胞;2BS
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胚肺二倍體細胞;2BS相關產品:小鼠核因子E2相關因子2ELISA檢測試劑盒說明
大鼠細胞間粘附分子2ELISA檢測試劑盒圖片
大鼠褪黑素受體ELISA檢測試劑盒說明
  胚肺二倍體細胞;2BS的詳細資料:

公司細胞廣泛用于國內院校的細胞生物學研究,作為實驗項目研究。下列產品詳細介紹:

產品名稱

生長特性

貨號

胚肺二倍體細胞;2BS

貼壁生長

EY-X63450

細胞名稱  胚肺二倍體細胞;2BS
形態特性: 成纖維細胞樣

生長特性: 貼壁生長

特征特性: 人胚肺二倍體細胞,來自于女孩胚胎,1976年由北京生物制品研究所建株。

培養條件: MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)新生牛血清,10%;水解乳蛋白,10%

傳代方法: 1:2-1:4

傳代情況: P21

凍存條件: 基礎培養基+8%DMSO+20%FBS

支原體檢測: 培養法(-)
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冷凍保存細胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法; 
2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃,并經過鉻酸洗液處理; 
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕; 
4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率; 
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
rrGDNF (50 UG)細胞名稱: 抗丙型肝炎病膜區抗原單克隆抗體雜交瘤細胞株;HCVEA-246 RPMI1640(w/oHepes)新生牛血清,10%

rrGDNF (10 UG)細胞名稱: 抗呼吸道合胞病單克隆抗體雜交瘤細胞株;RSV-4C1 DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)新生牛血清,10%

rrFractalkine (Chem Dom) (25 UG)細胞名稱: 抗戍型肝炎病單克隆抗體雜交瘤細胞株;HEV-4 DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)新生牛血清,10%

rrFGF-BP, CF (25 UG)細胞名稱: 小鼠胚胎細胞;SC-1 MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)新生牛血清,10%

rrFGF-BP (25 UG)細胞名稱: 小鼠結締組織L細胞株929克隆;L-929[L929] MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)馬血清,10%

rrFGF basic, CF (25 UG)細胞名稱: 非洲綠猴腎細胞;CV-1 MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)新生牛血清,10%

rrFGF basic (25 UG)細胞名稱: 非小細胞肺癌細胞;H125 RPMI1640(w/oHepes)優質胎牛血清,10%

rrFasL/TNFSF6, CF (25 UG)細胞名稱: 臍靜脈內皮細胞;HUV-EC Medium200+LSGS

rrFasL/TNFSF6 (25 UG)細胞名稱: 慢性髓系白血病細胞;K562 RPMI1640(w/oHepes)新生牛血清,10%

rrFas/TNFRSF6/Fc, CF (50 UG)細胞名稱: IL-2依賴的淋巴T細胞系;Kit225-k6 RPMI1640(w/oHepes)胎牛血清10%

rrE-Selectin (CD62E)/Fc, CF (100 UG)細胞名稱: 導管瘤細胞;BT-474 RPMI1640(w/oHepes)新生牛血清,10%;10ug/ml人重組insulin

rrEpo, CF (10 UG)細胞名稱: urkitt淋巴瘤細胞;Raji RPMI1640(w/oHepes)新生牛血清,10%

rrEpo (10 UG)細胞名稱: 急性髓性白血病細胞;KG-1a IMDM:Iscove'sModiefiedDulbecco'sMedium新生牛血清,20%

rrEphB1/Fc, CF (200 UG)細胞名稱: 直腸癌細胞;DiFi DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS

rrEphA5/Fc, CF (200 UG)細胞名稱: 小鼠纖維肉瘤細胞;WEHI-13VAR RPMI1640(w/oHepes)新生牛血清,10%

rRELMg MAb (Cl 395310) (100 UG)細胞名稱T淋巴細胞白血病細胞;C8166 RPMI1640(w/oHepes)新生牛血清,10%
胚肺二倍體細胞;2BS人抗鼠抗體(HAMA)ELISA試劑盒LEPELISAkit產品規格:48T/96T。

人可溶性腺苷環化酶(sAC)ELISA試劑盒LEPELISAKit產品規格:48T/96T。

人腺苷環化酶1(AC-1)ELISA試劑盒LEPELISAKit產品規格:48T/96T。

人促有絲分裂因子(MF/MPF)ELISA試劑盒LEPELISAKit產品規格:48T/96T。

人特異性巨噬細胞武裝因子(SMAF)ELISA試劑盒LEPELISAkit產品規格:48T/96T。

人晚期糖基化終末產物受體(RAGE/AGER)ELISA試劑盒LF/LTFAb-IgGELISAkit產品規格:48T/96T。

人芳香烴受體(AhR)ELISA試劑盒LFA-1ELISAKit產品規格:48T/96T。

5脂加氧酶(5-LO/LOX)ELISA試劑盒LFA-2ELISAKit產品規格:48T/96T。
操作步驟:
1、貼壁細胞的消化
①吸除培養液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養液洗滌細胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養器皿底部發現細胞的形態發生明顯的變
化;或者用槍吹打細胞發現細胞剛好可以被吹打下來,吸除細胞消化液。加入含血清的  *細胞培養液,吹打下細胞,即可直接用于后續實驗。
④如果發現消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發現細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經有部分直接從培養器皿底部脫落, 直接用細胞培養液把細胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細胞,盡量去除細胞消化液后,加入含血清的*培養液重新懸浮細胞,即可用于后續實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。

 

產品相關關鍵字: 胚肺二倍體細胞 2BS
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