公司細胞廣泛用于國內院校的細胞生物學研究,作為實驗項目研究。下列產品詳細介紹:
產品名稱 | 生長特性 | 貨號 |
赤狐皮膚成纖維樣細胞;RF-88S | 貼壁生長 | EY-X63784 |
細胞名稱 赤狐皮膚成纖維樣細胞;RF-88S
形態特性: 成纖維細胞樣
生長特性: 貼壁生長
特征特性: 該細胞系來源于一雌性赤狐的皮膚組織。1988年由中國科學院昆明細胞庫建立。赤狐具有B染色體。
培養條件: M-199:withEarle'sBalancedSaltsSolution(EBSS)15%NBS
傳代方法: 1:2傳代;3-4天一次
傳代情況: P4
凍存條件: 基礎培養基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測: 熒光法(-)
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冷凍保存細胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃,并經過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
水通道蛋白6檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠胚胎成纖維細胞;3T3-Swissalbino形態特性: 成纖維細胞樣Aquaporin 6
絲氨;蘇氨蛋白磷酶檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠胚胎成纖維細胞;3T6-Swissalbino形態特性: 成纖維細胞樣serine;threonine protein kinase
絲裂原活化蛋白激酶3檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠骨髓瘤細胞;P3/NSI/1-Ag4-1[NS-1]形態特性: 淋巴母細胞樣mitogen activited protein kinase 3
斯鈣素1檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠單核巨噬細胞;J774A.1形態特性: 單核細胞/巨噬細胞樣Stanniocalcin 1
斯鈣素2檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠骨髓瘤細胞;P3X63-Ag8.653形態特性: 淋巴母細胞樣Stanniocalcin 2
死亡受體3檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠結締組織細胞胸苷激酶缺陷株;L-M(TK-)形態特性: 成纖維細胞樣Death receptor 3
松弛素H2檢測試劑盒細胞名稱: 豚鼠胚胎細胞;104C1形態特性: 成纖維細胞樣Relaxin H2
性成纖維細胞生長因子1檢測試劑盒細胞名稱: 犬腎細胞;MDCK(NBL-2)形態特性: 上皮樣;多角acidic fibroblast growth factor 1
髓系細胞觸發受體-1檢測試劑盒細胞名稱: 貓腎細胞;CRFK形態特性: 上皮細胞樣Triggering Receptor Expresses on Myeloid Cells-1
髓系細胞觸發受體-2檢測試劑盒細胞名稱: 人肺癌細胞;H1299形態特性: 上皮樣細胞Triggering Receptor Expresses on Myeloid Cells-2
縮醛酶A檢測試劑盒細胞名稱: 大鼠腦膠質瘤細胞;C6形態特性: 成纖維細胞樣Aldolase isozyme A
胎兒纖維連接蛋白檢測試劑盒細胞名稱: 人淋巴瘤細胞;Romas形態特性: 淋巴母細胞樣fetal fibronectin
胎盤蛋白13檢測試劑盒細胞名稱: 人急性T淋巴細胞白血病細胞;Jurkat,CloneE6-1形態特性: 淋巴母細胞樣placental protein 13
胎盤蛋白14檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠T淋巴細胞;CTLL-2[CTLL2]形態特性: placental protein 14;Glycodelin-A
胎盤亮氨氨肽酶檢測試劑盒細胞名稱: 人急性單核細胞白血病細胞;J-111形態特性: 淋巴母細胞樣Placental leucine aminopeptidase
碳酐酶Ⅵ檢測試劑盒細胞名稱: 人喉癌上皮細胞;Hep-2形態特性: 上皮樣carbonic anhydrase Ⅵ
糖磺基轉移酶10檢測試劑盒細胞名稱: 人肺細胞;HLF-a形態特性: 上皮樣細胞Carbohydrate sulfotransferase 10
赤狐皮膚成纖維樣細胞;RF-88S改良EC(MEC+n)肉湯規格:新生霉素用途:4.5mg每支含量
NBB 培養基規格:250g用途:用于啤酒中厭氧菌檢測
Littman 瓊脂規格:250g用途:用于真菌的分離培養
真菌培養基規格:BR250g詳情介紹
(MUG)4-甲基傘形葡糖苷培養基規格:100g用途:用于藥品和生物制品中大腸埃希氏菌的檢測
腸球菌瓊脂(膽鹽-七葉苷-疊氮鈉瓊脂)規格:250g用途:用于腸球菌和腸道致病菌的分離培養
操作步驟:
1、貼壁細胞的消化
①吸除培養液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養液洗滌細胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養器皿底部發現細胞的形態發生明顯的變
化;或者用槍吹打細胞發現細胞剛好可以被吹打下來,吸除細胞消化液。加入含血清的 *細胞培養液,吹打下細胞,即可直接用于后續實驗。
④如果發現消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發現細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經有部分直接從培養器皿底部脫落, 直接用細胞培養液把細胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細胞,盡量去除細胞消化液后,加入含血清的*培養液重新懸浮細胞,即可用于后續實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。