綜合微生物的培養方法,包括以下步驟:
(1)前期準備:(A)滅菌處理;(B)制備Biolite水;(C)檢查設備和材料;
(2)按比例配制培養材料;
(3)導入曝氣,進行繁殖培養;
(4)取液觀察;(a)取液;(b)稀釋菌液;(c)平板培養;
(5)分離并檢測;
(6)取液儲存;通過該綜合微生物培養方法簡單可操作性強,培養的綜合微生物均在3代以內,菌類穩定不發生突變,且繁殖快速。
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規格參數:
產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
土曲霉品牌 | Aspergillu | EY-J963309 |
資源名稱: 土曲霉
種屬: Aspergillus terreus Thom
提供形式: 凍干粉
安全等級: 1
模式菌株: no
培養基: 綜合PDA:20%馬鈴薯液1.0L,葡萄糖20.0g,二氫鉀3.0g,七水鎂1.5g,1 8mg,瓊脂20.0g,pH自然。20%馬鈴薯液配置:取200g去皮馬鈴薯,煮沸30min,過濾取濾液,補足至1.0L。
生長條件: 25-28℃,好氧
低溫存法:
①簡單保存法,將瓊脂斜面孢子培養物、菌絲懸浮液以及由麩皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培養物置于4℃冰箱保存,保存時間不超過1~2個月,若將谷物原料制備的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蠟,以隔絕外界空氣和水汽,保持時間可達3~4個月;②液氮超低溫保存法,將生長穩定期的細胞懸浮在10%甘油或其他低冰點液體中,密封于安瓿管內,然后控制冷卻速度,使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時,即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多數微生物如病毒、噬菌體、多種細菌、放線菌、酵母和原蟲、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物,都可用此法保存。
微生物菌種的培養:
⒈ 孢子制備
⑴ 放線菌孢子的制備
一般采用瓊脂斜面培養基,培養基中含有一些適合產孢子的營養成分,如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無機鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1%,氮源不超過0.5%),碳源豐富容易造成酸性的營養環境,不利于放線菌孢子的形成,氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下,干燥和限制營養可直接或間接誘導孢子形成。放線菌斜面的培養溫度大多數為28 ℃,少數為37 ℃,培養時間為5~14天。
⑵ 霉菌孢子的制備
霉菌的孢子培養,一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農產品為培養基。這是由于這些農產品中的營養成分較適合霉菌的孢子繁殖,而且這類培養基的表面積較大,可獲得大量的孢子。霉菌的培養一般為25~28 ℃,培養時間為4~14天。
⒉ 種子制備
⑴ 搖瓶種子制備
搖瓶種子進罐,常采用母瓶、子瓶兩級培養,有時母瓶種子也可以直接進罐。種子培養基要求比較豐富和*,并易被菌體分解利用,氮源豐富有利于菌絲生長。原則上各種營養成分不宜過濃,子瓶培養基濃度比母瓶略高,更接近種子罐的培養基配方。
⑵ 種子罐種子制備
種子罐種子制備的工藝過程,因菌種不同而異,一般可分為一級種子、二級種子和三級種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中,經培養后形成大量的菌絲,這樣的種子稱為一級種子,把一級種子轉入發酵罐內發酵,稱為二級發酵。如果將一級種子接入體積較大的種子罐內,經過培養形成更多的菌絲,這樣制備的種子稱為二級種子,將二級種子轉入發酵罐內發酵,稱為三級發酵。同樣道理,使用三級種子的發酵,稱為四級發酵。
Loktanella│maricola 中文名稱:居海洛克氏菌Loktanella│maricola分離基物:樣/海提供形式:斜面培養物安全等級:1模式菌株:yes應用領域:模式菌株:;培養方法培養基:471生長條件:28℃存儲條件:液氮超低溫凍結法;-80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法 純度:>98.0%(GC)
Aquimarinamuelleri 中文名稱:AquimarinamuelleriAquimarinamuelleri分離基物:培養基:海樣本,日本安全等級:1模式菌株:yes應用領域:模式菌株:培養方法培養基:102生長條件:28℃ 純度:97%
Shimiaisoporae 中文名稱:ShimiaisoporaeShimiaisoporae安全等級:1模式菌株:yes應用領域:模式菌株:培養方法培養基:102生長條件:25℃ 純度:97%
Loktanella│hongkongensis 中文名稱:香港洛克氏菌Loktanella│hongkongensis分離基物:沉積物/深海淺黃色鈣質軟泥提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應用領域:端微生物/抗γ輻射培養方法培養基:1001生長條件:28℃存儲條件:液氮超低溫凍結法;-80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法 純度:97%
Roseivivaxisoporae 中文名稱:RoseivivaxisoporaeRoseivivaxisoporae安全等級:1模式菌株:yes應用領域:模式菌株:培養方法培養基:102生長條件:25℃ 純度:97%
Roseivivaxhalodurans 中文名稱:RoseivivaxhaloduransRoseivivaxhalodurans分離基物:疊層石上的輪藻安全等級:1模式菌株:yes應用領域:模式菌株:培養方法培養基:168生長條件:28℃ 純度:97%
Gramellaechinicola 中文名稱:GramellaechinicolaGramellaechinicola分離基物:中間球海膽安全等級:1模式菌株:yes應用領域:模式菌株:培養方法培養基:102生長條件:28℃ 純度:99%
Oceanicola│marinus 中文名稱:海洋海棲菌Oceanicola│marinus分離基物:樣/上層海提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應用領域:潛在的有機污染物降解菌/分離自石油富集菌群培養方法培養基:821生長條件:28℃存儲條件:液氮超低溫凍結法;-80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法 純度:99%
土曲霉品牌Nutrient Agar人表皮黑色素細胞-中色素微小RNA4-溴異喹啉H1N1(Influenza A virus ,hemagglutinin) 流感病A抗原
麥芽浸出液瓊脂人表皮黑色素細胞-深色素微小RNA4-溴異喹啉Haase(hyaluronidase) 透明質酶/玻璃酶抗原
Malt Extract Agar人成纖維細胞-胎兒微小RNA4-溴異喹啉HA tag HA tag標簽多肽
Fluid Lactose Medium人成纖維細胞-新生兒微小RNA4,4′-雙(2-苯并噁唑基)二苯乙烯HA tag(map) HA tag標簽(分支多肽)
Baird-Parker瓊脂基礎人成纖維細胞-微小RNA4,4′-雙(2-苯并噁唑基)二苯乙烯HAI-1(Hepatocyte Growth Factor Activator Inhibitor 1) 肝細胞生長因子激活物抑制因子抗原
Baird-Parker Agar Base人毛細胞微小RNA六銠三銨HBA1(hemoglobin alpha 1) 人類血紅蛋白α1抗原
卵黃亞碲鹽增菌液人生發基質細胞微小RNA3,5-二-4-基吡VWCE/URG11(von Willebrand factor C and EGF domain-containing) 乙型肝炎病X蛋白(HBxAg)抗原
EY lurite Enrichment人外根殼細胞微小RNA3,5-二-4-基吡URGCP/URG4(Up-regulator of cell proliferation) 乙型肝炎病X蛋白(HBxAg)抗原